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产品名称: TCM的纯化
产品名称:

TCM的纯化

上市日期: 2016-03-10
  • 产品概述
  • 产品规格
  • 详细参数

TCM 是指传统中药(Traditional Chinese Medicine)。中药的化学成分极其复杂,有效成分种类很多,诸如生物碱、甙、黄酮、醌、多酚、内脂、香豆素、萜、有机酸、寡糖、多糖、环肽、甚至蛋白,又常有数种有效成分并存、合成前体相同、配基链长不等、手性特征变化、含量特低,以及炮制反应等问题,故单一中药活性成分的纯化工艺开拓往往涉及多种分离技术以及各种技术之间的连接和配合。

 

GE 公司集数十年的纯化经验, 积累大量理论和技术在Sephadex ( 葡聚糖)、Sepharose ( 琼脂糖)、Monobeads、Source(聚苯乙烯)、Capto(高流速琼脂糖)等基架上开发有凝胶过滤、离子交换、金属鳌合、亲和层析、正相层析、反相层析等多种类型和多种性质的数百种色谱介质,供应从ng 到Kg 级的高、中、低压色谱设备提供凝胶过滤、离子交换、金属鳌合、亲和层析、反相层析、正相层析、逆流色谱等多种色谱技术体系。

 

一、TCM 纯化平台
生物碱纯化平台 ——Sepharose HP+ 中、高压硅胶反相
生物碱是来源于植物界的含氮有机化合物,为非常重要的中草药有效成分。在传统的硅胶或氧化铝层析上效果往往不理想。建议用

 

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有机酸纯化平台 —— >pH 11 的碱水提取+ 阴离子交换 Q Sepharose HP 或Sephadex LH 20 + 高压硅胶反相
有机酸多与钾、钙、钠或生物碱结合成盐,也以游离的形式存在而发挥生理作用,例如:柠檬酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸,与生物碱相反,有机酸带负电荷,纯化建议用>pH 12 的碱水和醇提取有机酸,直接上阳离子交换介质Q Sepharose HP,一步纯度可达50% 以上,然后再上(或直接上)Sephadex LH-20 或反相层析将纯度提高到90% 以上。

 

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皂甙纯化平台 —— >pH 11 的碱水提取+ 阴离子交换 Q Sepharose HP + 中、高压硅胶反相
皂甙是不少常用中草药的有效成份之一,如人参、柴胡、甘草、桔梗等。皂甙类分子由于同时具有强极性的糖基和弱极性的甾体,化学性质类似去污剂,振荡后会产生气泡,纯化常常遇到困难。不少皂甙含羧基,可用碱水加醇提取,直接上阴离子交换 Q Sepharose HP,它对皂甙类分子有特殊的选择性和纯化效果。

黄酮甙纯化平台—— 水和醇提取+ 阴离子交换 Q Sepharose HP 去色素+Sephadex LH 20 + 中、高压硅胶反相
Sephadex LH-20 由葡聚糖凝胶Sephadex G-25 交联亲脂性羟丙基而制成,它的一种特殊的纯化功能是分离甙元相同但所带糖基数量或种类不同的分子,糖基数量越多越早被洗脱。即使糖基数量相同,结构稍有不同,也可调节流动相将之分开。Sephadex LH-20 广泛地应用在黄酮类物质的分离纯化中,总括来说黄酮所含羟基数量越多,与Sephadex LH-20 结合越强。Q Sepharose FF 是去处植物色素的有效方法。例如葛根素,用Q Sepharose FF 可对粗品进行第一步纯化,再使用Sephadex LH-20 进行精细纯化,就可达到纯度为95% 以上的葛根素。

 

黄酮、萘醌纯化平台 —— 水和醇提取+ Sephadex LH 20+ 中、高压硅胶层析
近年掀起热潮的用于治疗心血管疾患及预防老人痴呆症的银杏,主要活性成份包括多个黄酮及内酯。槲皮素、山柰酚及异鼠李素三个黄酮化合物,具有扩张血管和解除痉挛作用,能扩张冠脉血管、增加冠脉流量,另外还与降低血酯、改善血液流变学、降低LPO、提高SOD 活力有关。

 

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多酚类纯化平台 —— 水和醇提取+ Sephadex LH 20 + 中、高压硅胶层析
Sephadex LH-20 与黄酮纯化类似,多酚的纯化也可根据所含羟基、芳香环、双键的数量、位置,以及与Sephadex LH-20 介质所形成的氢键的数量、强度的不同进行分离。总括来说多酚所含羟基、芳香环数量和所形成的氢键数量越多、越强,结合也越强,洗脱也较晚(如各种茶多酚、白藜芦醇的纯化)。

内脂、萜类纯化平台 —— Sephadex LH 20 或中、高压硅胶层析
中草药中的内脂、萜类大都较为弱极性分子,以传统的萃取、结晶、加上硅胶或氧化铝层析纯化。GE Healthcare Biosciences 生产的BioProcess 防爆防腐中、高压层析生产系统配和Fineline 350 或HPLC 层析柱已成功在国内外应用于紫杉醇的大规模生产。

 

蛋白质、活性肽、动植物毒素纯化平台 —— Sepharose离子交换; Superdex/Sephacryl 分子筛层析;SOURCE RPC 反相层析
近年不断发现许多常用中药中的蛋白质、糖蛋白都具药理活性,如枸杞子糖蛋白、银杏花粉蛋白、芦荟糖蛋白等。天花粉蛋白、具有溶血作用的蜂毒肽,兴奋中枢神经的蝎毒肽,治疗风湿性关节炎的蜂毒明肽,抗凝血药水蛭素、蛇毒酶。大部分蛋白酶在纯化时需留意保持其空间结构,避免失活,所以一般采用温和的离子交换和分子筛层析,肽分子则可使用反相层析。

 

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多糖 纯化平台 —— 水、醇提取+ 穿透式Sepharose 离子交换脱蛋白+ Superdex 200/Sephacryl 300-1000 分子筛层析
中药中如灵芝多糖、香菇多糖、黄芪多糖、人参多糖、具有增强免疫力、抗肿瘤作用。一种中药中往往含多种多糖,结构、性质、功效不一。如黄芪水提取液经DEAE 弱阴离子交换层析及Sephadex G100 分子筛层析纯化,可获AH-1,AH-2 及AG-2 等多个单一组份多糖。大黄水提液经乙醇提取及Sephadex G-200 分子筛层析获得DHP-1,DHP-2 两个单一组份多糖。新一代的Superdex 200 分子筛层析介质选择性与Sephadex 相同,而流速、分辩率、化学稳定性大大增加,比往Sephadex G 系列能分离出多数倍的多糖组分,时间更由以往的一天缩短到一小时。

 

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二、TCM 的色素去除
TCM的粗提物中常常含有大量的色素,一方面在层析过程中,采用紫外对目标物进行检测和追踪时,色素会掩盖掉目标物的信号,增加了纯化的困难程度;另一方面,随着中药要求的不断提高,在生产过程中,色素也成为质量控制的一个因素。阴离子交换 Q Sepharose FF 是去处植物色素的有效方法,比如,提取葛根素时,大量的色素也被提取出来,利用Q Sepharose FF 可对粗品进行第一步纯化,不仅大大提高了葛根素的纯度,而且除去了绝大多数色素,再使用Sephadex LH-20 进行精细纯化,就可达到纯度为95% 以上的葛根素。另外,Q Sepharose FF 在一些注射用中药产品的生产过程中,作为最后一步,能够有效的去除各成分中的
色素。

 

 

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