寡合苷酸广泛的用于基础研究或者诊断试剂,同时也应用于基因治疗上。虽然寡核苷酸的治疗还在起步段,但是已经有直接的证据显示反义核苷酸药物存在巨大的潜力。反义核酸(antisense oilgonucleotide)是基因治疗的一种方法,其原理是利用碱基配对规则,对相关基因调控。反义核酸可利用AKTA 规模DNA 合成仪进行合成,AKTA Oligo pilot 10/100 的合成规模为1-50 umol /50 umol-4 mmol。寡核苷酸的纯化采用一步阴离子交换层析Source 15 /30Q 进行,对比于传统的反向层析,具有更高的载量,收率和纯度,并且易于放大生产。
一、寡核苷酸的纯化平台
样品: DNA 20-mer, ATA CCA ATT AAA CAA AAT TT
上样量: 0.1 mg/ml medium
柱子: RESOURCE ™ Q 1 ml
Buffer A: 10 mM NaOH, pH 12
Buffer B: 10 mM NaOH, pH 12, with 1.5 M NaCl
流速: 300 cm/h
梯度: 0.25–0.75 M in 30 column volumes
检测波长: UV absorption at 254 nm, 5 mm cell
纯化时间: 25 min
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