产品展示
世界生命科学领域中国科研仪器设备行业领军企业
The world leader
产品中心 Products
全国统一业务咨询热线:
020-3195 4003
全国统一商务咨询热线:
020-3195 4010






地址:广州市海珠区新港西路135号中大科技园A座1104室
传真:020-8411 5724
E-mail:cleversys@163.com
产品名称: 质粒DNA的纯化
产品名称:

质粒DNA的纯化

上市日期: 2016-03-10
  • 产品概述
  • 产品规格
  • 详细参数

 质粒DNA(pDNA), 又称基因疫苗,或者核酸疫苗,是指将编码某种抗原的外源基因与质粒载体重组,构建出真核表达载体,通过肌肉注射等途径直接导入动物细胞,能利用宿主细胞的蛋白质合成系统合成外源抗原蛋白,并诱导宿主细胞产生对该抗原的体液和细胞免疫应用,以达到预防和治疗疾病的目的。DNA 疫苗比病毒类疫苗安全,但是因为药物使用量大,一般100 ug-1 mg,因此对药物的质量是要求很很高。

一、超螺旋DNA 的制备步骤如下
用于基因治疗,质粒DNA 必须为超螺旋结构并且不含细菌染色体DNA,RNA,蛋白质和内毒素。另外,纯化所用介质和工艺应便于顺利并节省成本地转化成大规模生产。由于绝大多数质粒DNA 生产所选用的宿主菌是大肠杆菌,纯化的实际问题就是去除其它核酸,内毒素和痕量污染物。

 

QQ截图20160310152709.png

 

第一步:高盐下,RNA 会积聚,与质粒DNA 的分子量上的差别更加显著,利用分子筛进行组份分离。同时去除残余的染色体DNA,这步是分子筛的组分分离,上样量达到30%CV,而且流速较快。

 

QQ截图20160310152856.png

 

第二步:PlasmidSelect Xtra 亲和介质,利用了嗜硫亲和与疏水作用原理,能特异性将开环的质粒(ocDNA) 和超螺旋的质粒(scDNA) 分开,并且载量可以达到2 mg/ml 介质。从而超螺旋DNA 的纯度提高到95% 以上。

 

QQ截图20160310152939.png

 

第三步:超螺旋DNA 的精细纯化,source 30Q 去除残余的RNA 和内毒素,同时浓缩样品

 

QQ截图20160310153016.png

 

 

HPLC 检测质粒纯度,使用Mini Q 用于质粒DNA 的纯度检测。

 

QQ截图20160310153110.png

Copyright © 2005 - 2013 广州隆泽生物科技有限公司
犀牛云提供企业云服务
地址:广州市海珠区新港中路135号中大科技园A座1104室
电话: 86 020-31954003 020-31954010
邮箱:cleversys@163.com
邮编:330520