如何精准建立原位肿瘤模型

时间:

2021-01-20

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原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,目前在世界范围内发病率呈上升趋势。近年来全球肝癌每年新发病例50-60 万,其中约 50%发生在我国。目前,肝癌在我国居恶性肿瘤死亡率的第二位。


肝癌发病原因是由病毒、化学致癌物、放射性物质等诸多因素引起肝细胞生长失控,以及与癌基因、抑癌基因调控和表达关系密切,肝癌的发生、发展的致病机理目前研究仍不清楚,也尚未有效的治疗方法,因此选择合适的肝癌动物模型,阐明肝癌的发生、发展机理以及研发新的药物具有重要的意义。


小鼠肝癌动物模型现主要有化学诱导性、移植性、转基因等方法。移植性小鼠肝癌模型的优点是饲养方便,操作简单,适用较大规模的实验。移植方式主要包括同种移植和异种移植。那么如何在目标位置上移植肿瘤细胞呢?


如何精准建立原位肿瘤模型


今天小编分享2019年发表在Theranostics杂志上的一篇文章(点击文末“阅读原文”可直达),利用这篇文章的实验过程给大家介绍如何通过超声图像引导注射装置,将N1-S1细胞注射到肝脏左叶包膜下,建立肝癌模型。


如何精准建立原位肿瘤模型

图1. N1-S1细胞目标注射位置(绿色)


试验方法


使用高频小动物超声成像系统Vevo®2100(VisualSonics; Toronto, Ontario, Canada),40MHz超声探头,在SD大鼠腹部找到肝左叶,使用该系统配有的超声图像引导注射装置,找到注射针头进入最佳位置,1X10e6 N1-S1细胞重悬在50μL Matrigel里,将细胞悬液注射到肝脏左叶的包膜下。


如何精准建立原位肿瘤模型

图2. Vevo图像引导注射装置


如何精准建立原位肿瘤模型

图3. A:肝脏超声(显示:皮肤、肌肉、肝脏);B:调整注射针位置(X、Y、Z),将针穿过皮肤、腹壁和肝脏,到达肝脏左叶的包膜下;C:注射N1-S1细胞悬液;D:注射后细胞的超声图像


实验结果


成功建立肝脏原位肿瘤模型,建模构建2周后,通过肝动脉导管注射放射性核素188Re-MS,使用SPECT/CT可以观察到接种原位肿瘤的存在。


如何精准建立原位肿瘤模型

图4. SPECT/CT下观测肿瘤细胞的生长


小结


利用Vevo图像引导注射技术,可以由超声B模式提供结构信息,同时观测注射器针尖所到的位置;注射支架系统可以帮助我们稳定注射器,微调注射器位置,以最精准的方式对目标位置进行注射操作,尤其适合肿瘤模型(原位瘤、转移瘤)的建立、各脏器精确给药等的研究。

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